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p-Nitrotetrazoliumblauchlorid, 1 g

≥98 %, p.a.
VE
Verp.
Nitro-BT, Nitroblau-Tetrazoliumchlorid, NBT
Summenformel C40H30Cl2N10O6
Molare Masse (M) 817,65 g/mol
Schmelzpunkt (F) 189 °C
Lagertemp.: +4 °C
WGK 1
CAS Nr. [298-83-9]
EG-Nr. 206-067-4

Substrat für die alkalische Phosphatase
Stammlösung: 0,5 g NBT in 10 ml 70 % Dimethylformamid. Vor Licht und Feuchtigkeit schützen.

Anwendung in Kombination mit BCIP-Toluidinsalz (X-Phosphat) zum Nachweis der alkalischen Phosphatase-Aktivität durch Bildung eines Indigo-Farbstoff-Präzipitats. Farbverstärker der Färbung mittels Alkalischer Phosphatase.
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89,90 €/VE 

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Best.-Nr. 4421.3

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Produktdetails



p-Nitrotetrazoliumblauchlorid ≥98 %, p.a.

Anwendung in Kombination mit BCIP-Toluidinsalz (X-Phosphat) zum Nachweis der alkalischen Phosphatase-Aktivität durch Bildung eines Indigo-Farbstoff-Präzipitats. Farbverstärker der Färbung mittels Alkalischer Phosphatase.


Mechanismus

Bei der Dimerisierung des ketonisierten X-Phos werden H+-Ionen frei, die NBT zum purpurnen Diformazan reduzieren. Beide Farbstoffe fallen in der Nähe der Phosphatase aus und färben die konkrete Stelle dunkelviolett. Siehe auch Versuchsprotokoll zur Anwendung von BCIP/NBT bei Immunoblot-Verfahren.



Technische Informationen
Anwendung Western, in situ, Histochemie 
Enzym Alkalische Phosphatase 
Nachweis Farbe (braun-violett) 
Signalprodukt Präzipitat (Blot) 
Verwendung Western, in situ, Histochemie 
p-Nitrotetrazoliumblauchlorid
Ausgewählte Menge:   0
  1. Zwischensumme:  0.00
Bestell Nr. VE Verp. Preis Menge
4421.1 100 mg Glas

18,90 €

4421.2 500 mg Glas

49,00 €

4421.3 1 g Glas

89,90 €

4421.4 5 g Glas

325,00 €

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Allgemeine Informationen

Versuchsprotokoll zur Anwendung von BCIP-p-Toluidinsalz/NBT bei Immunoblot-Verfahren:

Stammlösungen (Stabilität bei +4 °C ein Jahr):
0,5 g NBT in 10 ml 70 % Dimethylformamid.
0,5 g BCIP-p-Toluidinsalz in 10 ml 100 % Dimethylformamid.
Inkubationspuffer für die Alkalische Phosphatase:
100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 100 mM TRIS (pH 9,5).
Frische Substratlösung: 66 μl der NBT-Stammlösung + 10 ml des Inkubationspuffers, gut mischen, 33 μl BCIP Stammlösung hinzufügen. Innerhalb einer Stunde verbrauchen.
Blot-Entwicklung: Ca. 10 ml der Substratlösung pro 15 x 15 cm2 Membranoberfläche. Entwicklung bei Raumtemperatur, bis Banden sichtbar werden (ca. 30 min).
Reaktions-Stopp: Mit PBS/20 mM EDTA spülen.


Ansatz für den Nachweis der Peroxidase-Aktivität (Immunoassay):

1 mg TMB in 0,1 ml Dimethylsulfoxid (Best.-Nr. 4720) auflösen. 9,9 ml einer 0,1 M Natriumacetat-Lösung (pH 6,0) (Pulver: Best.-Nr. 6779) hinzufügen, filtern und H2O2 (Best.-Nr. 8070) (Endkonzentration 0,01 %) zugeben.

Immer frisch ansetzen!

Inkubation 10-30 min bei Raumtemperatur (ca. 50 μl pro Mikrotiterwell; anschließend Zugabe von 50 μl 1 M H2SO4, Best.-Nr. X873, pro Well).
Photometrische Quantifizierung bei 450 nm.

Literaturhinweis: Bos E.S. et al. (1981) J. Immunoassay 2, (3/4), 187.


Analysenzertifikate

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Es wurden die folgenden Analysezertifikate gefunden:

Typanalyse

Gehalt (HPLC)≥98 %
Wasser (KF)≤5,0 %